کالیبراسیون اسپکتروفتومتر

اسپکتروفتومتر UV-Vis در آزمایشگاه

یکی ازدستگاه های آنالیز آزمایشگاهی که نسبتا ساختار پیچیده ای دارد اما بسیار پرکاربرد است. از این دستگاه عموما برای اندازه گیری های کمی استفاده می شود و کمتر کاربردهای کیفی و شناسایی دارد. در واقع اسپکتروفتومتر در آزمایشگاه های صنایع مختلفی مانند داروسازی، غذایی، آب و فاضلاب و … برای اندازه گیری غلظت نمونه های مجهول به کار برده می شود. اسپکتروفتومتر مرئی فرابنفش در تعیین کمی غلظت جاذب در محلول های یون های فلزات واسطه و ترکیبات آلی بسیار مزدوج استفاده می شود. مانند همه دستگاه های اندازه گیری در آزمایشگاه ها، کالیبراسیون اسپکتروفتومتر نیز بسیار مهم است. دوره های کالیبره کردن این دستگاه معمولا طولانی تر است. اما باید پارامترهای مختلف آن مانند طول موج، جذب، رزولوشن و … کنترل و کالیبره شوند.

در این مقاله روش کالیبراسیون همه پارامترهای اسپکتروفتومتر مرئی – فرابنفش را بررسی می کنیم.

رویان ایران بزرگترین مرجع تخصصی فروش تجهیزات آزمایشگاهی، انواع مدل های اسپکتروفتومتر هانون و اسپکتروفتومتر UV1100 را با قیمت مناسب، یک سال ضمانت و 10 سال خدمات پس از فروش، عرضه می کند.

پارامترهای کالیبراسیون اسپکتروفتومتر مرئی – فرابنفش

دستگاه اسپکتروفتومتر UV-Vis از قسمت های مختلفی تشکیل شده است. بنابراین برای کالیبره کردن آن چند فاکتور مختلف کالیبره شوند. این فاکتورها شامل موارد زیر است:

• کنترل طول موج
• کنترل جذب
• حد نورهای پراکنده
• قدرت تفکیک یا رزولوشن
• حلال ها
• سل ها

روش هایی که برای کالیبره کردن هرکدام از پارامترها در مراجع مختلف پیشنهاد شده اند، تقریبا مشابه یکدیگر هستند. دستورالعمل های زیر از فارماکوپه امریکا و اروپا استخراج شده اند.

کالیبراسیون طول موج اسپکتروفتومتر

آماده سازی محلول های کالیبراسیون طول موج  

برای بررسی و کالیبراسیون طول موج اسپکتروفتومتر و صحت آن، از محلول هولمیوم پرکلرات استفاده می شود. این محلول را می توان به راحتی در آزمایشگاه می توان تهیه کرد. برای آماده سازی این محلول ابتدا باید محلول 1.4 مولار پرکلریک اسید را تهیه کنید. سپس 400 میلی گرم هولمیوم را به دقت وزن کنید. در یک بالن حجمی 10 میلی لیتری، حدود 5 میلی لیتر از محلول پرکلریک اسیدی که آماده کرده اید را بریزید. 400 میلی گرم هولمیوم را به آن اضافه کنید. خوب تکان دهید تا کاملا حل شود. با استفاده از همان محلول پرکلرید اسید، به حجم 10 میلی لیتر برسانید و دوباره خوب به هم بزنید تا کاملا همگن شوند.

روش کالیبراسیون طول موج

• بیس لاین (Base line) را با محلول 1.4 مولار پرکلریک اسید بگیرید.
• طیف UV محلول هولمیوم ساخته شده در مرحله قبل را در محدوده 200 تا 600 نانومتر بگیرید.
• پیک هایی را در ناحیه های 241.15، 287.15، 361.5، 486.0 و 536.3 نانومتر باید مشاهده کنید.
• حد مجاز انحراف در ناحیه فرابنفش ینی در محدوده 200 تا 400 نانومتر، 1± نانومتر و در ناحیه مرئی یعنی حدود 400 تا 800 نانومتر، 3±  نانومتر است.

کالیبراسیون جذب اسپکتروفتومتر

از آنجایی غلظت یک گونه جاذب به طور مستقیم با جذب اندازه گیری شده متناسب است، خطی بودن مقیاس فتومتریک باید تایید شود.

آماده سازی محلول های کالیبراسیون جذب

محلول 0.005 مولار سولفوریک اسید: داخل یک بالن حجمی 2000 میلی لیتری، حدود 50 میلی لیتر آب مقطر بریزید. 0.54 میلی لیتر سولفوریک اسید غلیظ را داخل آن اضافه کنید. سپس تا خط نشانه، با آب مقطر به حجم برسانید.

پتاسیم دی کرومات را تا دمای 130 درجه کاملا خشک کنید. سپس مقداری بین 57 تا 63 میلی گرم از آن را وزن کنید. یک بالن حجمی 1000 میلی لیتری بردارید. داخل آن حدود 300 میلی لیتر از محلول سولفوریک اسیدی 0.005 مولار بریزید. سپس مقدار وزن شده نمک پتاسیم دی کرومات را به آن اضافه کنید. به هم بزنید تا کاملا حل شود. با همان محلول سولفوریک اسید تا خط نشانه به حجم برسانید.

دوباره مقداری بین 57 تا 63 میلی گرم از پتاسیم دی کرومات خشک شده را وزن کنید. داخل یک بالن 100 میلی لیتری، مقداری محلول سولفوریک اسید بریزید و پتاسیم کرومات را نیز به آن اضافه کنید. پس از حل شدن کامل، با محلول 0.005 مولار سولفوریک اسید به حجم برسانید.

روش کالیبراسیون جذب

• سیگنال بلانک را با استفاده از سولفوریک اسید 0.005 مولار در محدوده 200 تا 600 نانومتر بگیرید.
• جذب محلول اول را در 235، 257، 313 و 350 نانومتر ثبت کنید.
• جذب محلول دوم را در 430 نانومتر اندازه گیری کنید.
• جذب ویژه را با استفاده از رابطه زیر به دست آورید:

Absorbance at x nm × final volume × 10 / weight of sample (mg)

مقدار مجاز انحراف 0.01± است.

نحوه سفارش و خرید دستگاه اسپکتروفتومتر از رویان ایران

کالیبراسیون اسپکتروفتومتر نسبت به برخی از دستگاه های آزمایشگاهی پیچیدگی بیشتری دارد. به همین دلیل سعی کردیم با بیان ساده مهم ترین بخش های کالیبراسیون اسپکتروفتومتر را در این مقاله به طور کامل بررسی کنیم. این دستورالعمل نه تنها مناسب اسپکتروفتومترهایی است که از رویان ایران خریداری کرده اید، بلکه برای انواع دستگاه ها و مدل ها کاربرد دارد. اسپکتروفتومترهای هانون و UV1100 را می توانید قیمت مناسب به صورت آنلاین همین حالا از بخش فروشگاه آنلاین رویان ایران خریداری نمایید. برای مشاوره رایگان و پاسخ به سوالات بیشتر، کارشناسان رویان ایران همه روزه پاسخگوی شما هستند.