نحوه کالیبراسیون سمپلر یا میکروپیپت

کالیبراسیون سمپلر

كاليبراسيون ابزارهاي حجم سنجي یا سمپلر ها از اولويت هاي هر آزمايشگاه مي باشد چرا كه اندازه گيري مقادير برداشتي براي كيت هاي مصرفي براي شناسايي يون ها، مواد و پروتئین هاي بيولوژيك نيازمند ابزار حجم سنجي دقيق مي باشد. از اين رو تمامي كاركنان آزمايشگاه بايد روش انجام كاليبراسيون را دانسته و به صورت دوره اي در بخش فني فعاليت خود انجام داده و مستندات مربوطه را ثبت و نگهداري نمايند.  ابزارهاي حجم سنجي عبارتند از پيپت، سمپلر، بشر، ارلن، مزور و … كه هر كدام نيازمند كاليبراسيون مي باشند.

نحوه كاليبراسيون سمپلر یا میکروپیپت

ارزيابي به دو روش وزن سنجی و رنگ سنجي قابل انجام است، ولي در نبود ترازوهايي با رزولوشن مناسب براي كنترل سمپلر و کاليبراسيون منظم، استفاده از روش رنگ سنجي، توصيه مي شود. رنگ سنجی به عنوان روشی مقرون به صرفه شناخته می شود که بیشتر آزمایشگاه های معتبر آن را به کار می برند. در اين روش با استفاده از يك محلول رنگي با جذب پايدار، مثل رنگ سبز خوراكي در طول موج 620 یا 630 نانومتر يا پارانيتروفنل در طول موج هاي 401 يا 405 نانومتر، صحت عملكرد سمپلر و نيز قابليت تکرار آن كنترل مي شود. از آن جا که اغلب فتومترها بهترين عملکرد خود را در محدوده جذبي 0.4 نشان مي دهند محلول هاي ذخيره رنگي با غلظتي تهيه مي شوند که پس از مرحله رقيق شدن داراي جذبي در حدود 0.4 باشند.

كاليبراسيون سمپلر به دو روش صورت مي گيرد

• روش رنگ سنجي  با استفاده  از رنگ سبز خوراكي و پارانيتروفنل
• روش حجم سنجي

کالیبراسیون سمپلر با رنگ سبز خوراكي

براي هر گروه بايد يك محلول ذخيره از رنگ سبز خوراكي تهيه نمود. سمپلرها در كارهاي متداول به دو گروه 10 تا 100 ميكروليتر و 100 تا 1000 ميكروليتر تقسيم مي شوند. 155 ميلي گرم درصد رنگ سبز در آب مقطر حل شده و براي گروه 100 تا 1000 ميكروليتر محلول 15.5 ميلي گرم آماده مي شود. غلظت در محلول هاي ذخيره به گونه اي انتخاب شده كه محلول 155 ميلي گرم درصد پس از رقيق شدن به نسبت 1.101 و محلول 15.5 ميلي گرم درصد پس از رقيق شدن به نسبت 1.11 و جذبي حدود 0.4 داشته باشد .

سمپلرهای 100 تا 1000  میکرولیتر:

15.5 میلی گرم پودر رنگ سبز در 100 میلی لیتر آب مقطرحل شود.  (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه ، 15.5 میلی گرم درصد است).

سمپلرهای 10 تا 100 میکرولیتر:

  155 میلی گرم پودر رنگ سبز در 100 میلی لیتر آب مقطر حل شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه 155 میلی گرم درصد است) .

سمپلرهای کمتر از 10 میکرولیتر:

1.55 میلی گرم پودر رنگ سبز در 100 میلی لیترآب مقطر حل شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه 1.55 میلی گرم درصد یا 1550 میلی گرم درصد است).

کالیبراسیون سمپلر با محلول پارانيتروفنل

به جاي رنگ سبز خوراكي مي توان از محلول پارانيتروفنل استفاده نمود. در اين روش محلول ذخيره با توجه به حجم سمپلر تهيه مي شود. سمپلرهاي با حجم كمتر از 10 ميكروليتر براي تهيه محلول ذخيره 420 ميلي گرم. پارانيتروفنل در 100 ميلي ليتر آب مقطر حل مي شود.

سمپلرهای  100 تا 1000 میکرولیتر:

42 میلی گرم پودر پارانیتروفنل، در یک لیتر آب مقطر حل می شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه،  42 میلی گرم در لیتر است)

سمپلرهای  10 تا 100 میکرولیتر:

42 میلی گرم پودر پارانینترفنل، در100میلی لیتر آب مقطر حل می شود. (غلظت رنگ در محلول ذخیره این گروه 42 میلی گرم درصد است).

سمپلرهای کمتر از 10 میکرولیتر:

420 میلی گرم پودر پارانتیروفنلنرمال تهیه شود. درحالی که برای رنگ سبز خوراکی باید از آب مقطر استفاده شود.

*نکته: در سال های گذشته رنگ سبز خوراکی گاهی به صورت ناهمگون و یا محلول عرضه شده که در این موارد، دستور کار بالا کاربرد نداشته و بهتر است از پارانیتروفنل استفاده شود.

منبع : رویان ایران | بزرگترین مرجع تخصصی تجهیزات آزمایشگاهی کشور