الکتروفورز افقی

الکتروفورز افقی چیست

الکتروفورز افقی ژل ‌آگارز، یکی از ابزارهای مورد نیاز آزمایشگاه های زیست‌ شناسی مولکولی است. یکی از معایب ژل ‌آگارز این است که جداسازی قطعات کوچک DNA با تفاوت­ های ناچیز در حد چند جفت باز و همچنین تفکیک قطعات کوچک مولکول ­های DNA و پروتئین در این ژل به‌ خوبی امکان‌ پذیر نیست که به ‌طور متداول در این موارد از ژل پلی‌ اکریل ‌آمید استفاده می ­شود. دستگاه الکتروفورز افقی، دو منظوره است و می­توان از آن هم برای ژل آگارز  و هم برای ژل پلی ‌اکریل‌ آمید استفاده نمود.

مقایسه محصولات الکتروفورز 

عکس دستگاه	شرکت تولیدکننده	مدل دستگاه	ابعاد ژل (cm)	حجم بافر (ml)	حداکثر نمونه
	پدیده نوژن	HU95	۱۰×۷ ـ ۵×۷	۵۰۰	۱۴
	دناژن	Midi HD ۱۰×۱۰	۱۰×۱۰ ـ ۱۰×۷	۳۰۰	۲۸
	پایا پژوهش	هلنا	۸ ورقه ۲/۶× ۷/۶	۳۰۰	۱۶

جهت خرید و اطلاع از قیمت های بروز انواع الکتروفورز با کارشناسان ما در مجموعه رویان ایران تماس بگیرید.

 شماره تماس: 6417 814 0912

کاربرد و عملکرد دستگاه الکتروفورز افقی

الکتروفورز افقی نسبت به الکتروفورز عمودی  مفید تر، ساده ­تر و حتی بهتر عمل می کند. در الکتروفورز افقی سینی ژل تانک الکتروفورز به صورت افقی قرار می گیرد. روش الکتروفورز افقی را اولین بار بریگام و همکارانش ابداع کردند و تا کنون روش های مختلفی برای الکتروفورز افقی پلی اکریل آمید ابداع شده است.

در این روش مواد شیمیایی ژل مربوطه به سطح شیشه­ ای می چسبند و ادامه الکتروفورز افقی بر روی آن اعمال می شود. از الکتروفورز افقی جهت تفکیک ماکرومولکول ها و هم چنین بررسی محصولات کلون سازی و واکنش های pcr استفاده می شود.

شکل 1شمایی از الکتروفورز افقی

نکاتی که باید هنگام کار با دستگاه الکتروفورز افقی بدانید:

• در طول ثابت شدن ژل مایع بر سینی و ایجاد چاهک های نمونه ریزی در ژل، شانه باید به صورت ثابت باشد.
• هنگام کار با دستگاه جهت کاهش تبخیر بافر و عدم ریختن آشغال در آن، درپوش آن گذاشته شود.
• هنگام اجرای فرایند در الکتروفورز، از تکان دادن آن خودداری شود.
• جهت حرکت نمونه ها داخل ژل از قطب + به – است. باید دقت شود نمونه ها در ابتدا، سمت + قرار داده شوند تا در داخل ژل جداسازی نمونه انجام بگیرد و به بیرون از ژل نریزد.
• مدت زمان فرایند جداسازی نباید بیشتر از حدی باشد که نمونه ها به بیرون از ژل بریزند.
• حجم بافر تانک نباید از 850 میلی لیتر بیشتر شود. همچنین سطح بافر باید حداقل 1میلی متر روی ژل را بگیرد.
• دقت شود هنگام ریختن ژل مایع جهت ثابت شدن در سینی و ایجاد چاهک ها، زیر سینی بر روی صفحه  تراز شده (غیر مایل) قرار بگیرد.
• در صورتی که بافر هنگام اجرای فرایند داغ گردید، تانک الکتروفورز در محیط خنک مثل آب-یخ قرار بگیرد.

نحوه نگه داری از دستگاه الکتروفورز

• از بافر با ترکیب و pH مناسب استفاده شود.
• بافر کثیف یا چند بار استفاده شده موجب جرم گیری دستگاه و الکترود ها می شود.
• دقت شود سیم الکترود توسط جسمی مورد آسیب، شل شدن یا پارگی قرار نگیرد.
• در صورتی که در استفاده نامناسب بر الکترود رسوب گرفته شده باشد، با الکل و دستمال با احتیاط  می توان  آن را تمیز نمود.
• اتصال قطب +/- برق ورودی باید به درستی به الکترود های +/- وصل شود.
• حداکثر ولتاژ 300 ولت استفاده شود.

منبع : رویان ایران | بزرگترین مرجع تخصصی تجهیزات آزمایشگاهی کشور